吴澎1，单长松1，崔婷婷1，赵子彤1，王超2，周涛2，孙玉刚3*
1(山东农业大学食品科学与工程学院，山东泰安,)2(山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安,)3(山东省果树研究所，山东泰安,)
摘要：比较以“吉塞拉5”和“大青叶”作为砧木的“美早”大樱桃成熟果实香气成分的差异，为大樱桃嫁接生产中砧木的选择提供理论依据。该研究采用固相微萃取结合气相色谱质谱联用仪(GC-MS)的方法对香气成分进行测定分析。结果表明：从2组样品中共检测到31种香气成分，主要为烃类、醇类、醛类和酯类。从砧木为“吉塞拉5”和“大青叶”的“美早”大樱桃成熟果实中分别检测出27种和25种香气成分，各自所特有的香气组分分别为6种和5种，含量较高的是己醛、2-己烯醛、苯甲醛、顺-2-己烯-1-醇、正己醇、苯甲醇等，是“美早”大樱桃成熟果实的特征香气成分。砧木为“吉塞拉5”的“美早”大樱桃成熟果实特征香气成分中己醛、苯甲醛、苯甲醇、反-2-己烯-1-醇乙酸酯的含量均高于“大青叶”砧果实中的含量，可能是造成2种不同砧木樱桃果实风味差异的主要因素之一。
关键词：樱桃;砧木;挥发性物质;固相微萃取;气质联用
樱桃为蔷薇科李属樱桃亚属(Cerasus)果树。“美早”大樱桃是大连农业科学研究所从美国引入的一种早熟的樱桃优良新品种，产量大，抗裂果，果实成熟期一致。
成熟果实的香气成分是由多种香气成分共同作用形成的，是影响果实鲜食以及品质的重要因素[1]，也是吸引消费者的主要因素之一。在样品的预处理阶段，采用高效的方法从试样中提取香气成分是进行香气物质分析的一个重要环节。
固相微萃取技术(solidphasemicroextraction,SPME)是一种无溶剂参与的样品预处理新技术，具有预处理阶段不需有机溶剂、样品量少、灵敏度高等多种特点，固相微萃取技术与气相色谱质谱联用(SPME-GC-MS)可以集采样、萃取、进样等多个处理于一体，大大提高了分析的速度和灵敏度[2]。目前，国内外利用固相微萃取与气相色谱质谱联用技术对果实香气成分的研究主要集中在苹果、葡萄等方面[3-5]，对樱桃各品种果实香气成分的分析研究处于起步阶段。
国内外砧木大樱桃苗木主要以嫁接繁育为主，砧木影响着接穗品种的整个生长发育进程，选择与大樱桃嫁接亲和力强的砧木至关重要。近几年，国内外关于樱桃不同品种及其发育过程中香气成分的研究[6-7]也有报道，并对部分樱桃品种的特征香气做出分析鉴定[8-9]，而对“美早”新品种大樱桃果实特性香气的研究以及不同砧木对“美早”大樱桃果实香气成分的影响尚未见报道。本研究分析了以“吉塞拉5”和“大青叶”为砧木的“美早”大樱桃果实的香气成分，以期为生产“美早”大樱桃嫁接砧木的选择提供理论依据。
1材料与方法1.1实验材料
实验样品于年5月采自山东省泰安市果树研究所大樱桃示范园，园内樱桃树长势良好，树型为纺锤形，灌溉、施肥条件良好，土壤为砂壤，管理水平良好，树龄6年。樱桃品种为“美早”甜樱桃，砧木分别为“吉塞拉5”和“大青叶”。
2-辛醇(色谱纯99%)，Sigma-Aldrich公司；NaCl(分析纯)，上海国药集团化学试剂有限公司。
1.2主要仪器
气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)QPPlus,日本岛津公司；SPME手动进样手柄,美国Supelco公司、50/30μmDVB/CAR/PDMS纤维萃取头,美国Supelco公司；色谱柱Rtx-5MS(60m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱；恒温磁力搅拌器,日本岛津公司；pH计,美国ORION公司；WYT手持式折射仪,日本ATAGO公司。
1.3样品前处理
试验样品均采摘于果实完全成熟时，随机从树冠外围采摘样品果30个，常温下用保鲜盒盛放并快速送至山东农业大学园艺科学与工程中心实验室，4℃保存备用。采摘时砧木为“吉塞拉5”和“大青叶”的“美早”甜樱桃果实内含物指标见表1。
表1供试样品果实内含物指标
Table1Thenutritionalingredientofsamples
1.4仪器分析
1.4.1顶空固相微萃取
顶空固相微萃取参考郭东花等[10]的方法，并略作修改。每个处理分别取大小均匀的10个大樱桃果实，洗净后去皮、去核，用水果刀将果肉切碎并研磨，取20g研磨后的果肉，加入0.5g无水NaCl，同时加入4μLmg/L的2-辛醇标样于mL的螺丝口样品瓶中，立即用锡箔纸密封瓶口并旋紧瓶盖，置于40℃恒温磁力搅拌器上，磁力搅拌速率为r/min，平衡10min，然后固相微萃取吸附30min，立即插入色谱气化室，解吸3min，进行气相色谱-质谱联用分析。每个品种3次重复，取平均值。
1.4.2GC-MS测定条件
色谱柱Rtx-5MS(60m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱，程序升温：初始温度40℃，保持2min，以8℃/min升至℃，然后再以10℃/min升至℃，保持5min；载气为高纯氦气(99.%)，流速1.0mL/min；进样口温度℃，解析3min，进行样品热脱附。EI离子源70eV，离子源温度为℃；接触面温度为℃，采用SCAN模式进行全扫描，扫描范围为m/z=45～。
1.4.3定性定量分析方法
定性方法：GC-MS分析检测到的挥发性化合物质谱图经计算机检索并与NIST14质谱库进行匹配检索分析，结合保留时间和匹配度以及相关文献进行谱图解析，对检出物质各组分进行定性分析。
定量方法：樱桃果实中挥发性物质的定量采用内标法分析，以2-辛醇作为内标物进行质量浓度计算。计算公式如下：
(1)
式中：Xi为待测物质含量；Cs为樱桃样品中内标物(2-辛醇)浓度；As为内标物的峰面积；Ai为待测物的峰面积，fi为待测组分i对内标物s的质量相对校正因子，本试验中假定各待测组分i的相对校正因子均为1。
1.5统计学分析
用Excel软件对实验数据进行统计；用Origin9.1软件对实验数据进行作图；用统计分析软件SPSS19.0对实验数据进行相关性分析并进行显著性检验。
2结果与讨论GC-MS检测到的成熟后2种不同砧木“美早”大樱桃果实的挥发性物质成分总离子图如图1所示。经计算机质谱库(NIST14)检索并结合相关文献资料对质谱图解析，确认各挥发性组分，结合峰面积归一化法，得各组分的含量(表2)。
1-砧木为“吉塞拉5”的“美早”甜樱桃总粒子流图；2-砧木为“大青叶”的“美早”甜樱桃总粒子流图图1两种不同砧木“美早”大樱桃果实香气成分的总离子流图Fig.1Totalionicchromatogramofaroma
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